1.球蛋白的提取:白芸豆烘干粉碎后过60目筛,按1∶10 加入蒸馏水,在40℃提取2次,每次2h,提取后离心,弃去上清液,取沉淀干燥,作为球蛋白提取试验的原料。在NaCl 浓度2.5 g/100 m L,料液比1∶22(g/mL),提取温度55℃ ,提取时间5h等的条件下得到的球蛋白提取液经4000 rpm离心20 min 取上清液,测定上清液中的蛋白含量。
2.清蛋白的提取:取60目细度的白芸豆粉,按1∶8( g/m L) 的料液比加入蒸馏水,在55℃ 温度下浸提3h后,4000r/min离心20min,上清液即为白芸豆清蛋白提取液。
3.α-淀粉酶抑制剂的提取:α-淀粉酶抑制剂的制备主要有两种方法, 即发酵法和植物提取法。
作为植物源获得的α-AI, 其分离纯化方法的主要步骤包括磨碎、热处理或用水浸提、用硫酸铵沉淀或乙醇分离、过DEAE-cellulose柱层析、Sephadex G-75 柱凝胶层析以及CM-celulose柱层析后分离, 冻干得白色粉末状酶。还报道有提纯方法是:植物籽实经水浸泡→研磨组织→离心, 收集上清液→迅速升温, 选择性热变性→冷至室温后, 离心收集上清液→盐析沉淀→缓冲液透析→DEAE-32层析→聚乙二醇 6000浓缩→亲和层析→浓缩冻干。